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多肽蛋白偶聯KLH, BSA, OVA
多肽抗原由于太小而不能產生顯著的免疫反應,因此需要將多肽抗原偶聯到KLH(Keyhole Limpet Hemocyanin)、BSA(Bovine Serum Albumin)、OVA(Ovalbumin)等較大的蛋白載體上。KLH由于在ELISA或Western blotting檢測中沒有抑制作用從而不影響檢測結果。常用的偶聯原理是順丁烯二酰亞胺理論, 即將多肽中的半胱氨酸殘基與載體蛋白偶聯。因此合成抗原多肽時,在其N端或C端添加一個半胱氨酸殘基有利于多肽與載體蛋白的偶聯。
一般來說,多肽可以與蛋白偶聯的條件如下:
◆ Cys上的巰基(-SH)可以進行偶聯反應(推薦)
◆ 或擁有一個未保護(自由)的氨基或羧基